Поиск

Разработка способа определения относительной доли соложеного и несоложеного сырья-ячменя в дробленых зернопродуктах методом ОТ-ПЦР

Авторы: Вафин, Р. Р. Михайлова, И. Ю. Семипятный, В. К. Агейкина, И. И.
Подробная информация
Индекс УДК 663/664
Разработка способа определения относительной доли соложеного и несоложеного сырья-ячменя в дробленых зернопродуктах методом ОТ-ПЦР
Ч. 1
Рамиль Ришадович Вафин, Ирина Юрьевна Михайлова, Владислав Константинович Семипятный, Ирина Игоревна Агейкина
Аннотация Ячменный солод, полученный из пивоваренных сортов ячменя, является традиционным сырьем для производства пива. Наряду с инновационным методом инфракрасной спектроскопии и классическими физико-химическими методами определения качественных показателей солода видится целесообразным и применение ДНК-технологий, обладающих диагностическим потенциалом оценки степени пророщенности зерна в процессе солодоращения и установления доли солода в дробленых зернопродуктах. Целью настоящей работы являлась разработка молекулярно-генетического способа определения относительной доли соложеного и несоложеного сырья-ячменя в дробленых зернопродуктах методом обратно-транскриптазной полимеразной цепной реакции (ОТ-ПЦР). Объектами исследования послужили цельное зерно ячменя и приготовленный из него сухой ячменный солод, подвергнутые процедуре измельчения для получения дробленых зернопродуктов с различной относительной долей соложеного и несоложеного сырья. Экстракция нуклеиновых кислот из пробоподготовленного материала проведена коммерческим набором innuPREP Plant DNA Kit, а для постановки ОТ-ПЦР использован коммерческий набор OneTube RT-PCRmix. Программный анализ амплифицированных нуклеиновых кислот выполнен с применением приложений CLIQS и Adobe Photoshop. В результате проведенного исследования визуально и программно прослежена динамика увеличения яркости свечения амплифицированных ОТ-ПЦР-продуктов по мере повышения в исследуемых образцах дробленых зернопродуктов доли соложеного сырья-ячменя (солода), что составило теоретическую основу разработки способа. При этом показатель "Сумма Band 1/Сумма Band 2" максимального значения серого в Adobe Photoshop был более сглажен и наиболее приближен к визуальному восприятию электрофоретической картины в сравнении с инструментами измерения CLIQS. Разработанный способ предусматривает гель-электрофорезную детекцию ОТ-ПЦР-продуктов, амплифицированных из образцов экстрагированных нуклеиновых кислот ячменя, а также программный относительный количественный анализ с последующим выстраиванием процентной шкалы относительной доли солода в дробленых зернопродуктах Выявленная погрешность измерений в определенной степени характерна для электрофоретического метода детекции в агарозном геле, адаптируемого для относительной количественной оценки анализируемых образцов ДНК.
Название источника Пищевая промышленность
Место и дата издания 2022
Прочая информация № 8. - С. 62-65