Индекс УДК | 535.33 |
Регистрация бромирующей активности миелопероксидазы с помощью флуоресцеина Д. В. Григорьева, И. В. Горудко, В. Е. Реут [и др.] |
|
Аннотация | Исследовано изменение спектрально-люминесцентных свойств флуоресцеина после его взаимодействия с различными активными формами кислорода и галогенов (О[2] *{-}, H[2]O[2], HOCl, HOBr, HOSCN, N-хлорамин и N-бромамин таурина), а также в системе миелопероксидаза (МПО) -Н[2]О[2]-Cl{-}/Br{-}/SCN{-}. Установлено, что после взаимодействия исключительно с HOBr, а также в системе МПО-Н[2]О[2]-Br{–} флуоресцеин превращается в соединение с максимумом поглощения на 518 нм. Максимум флуоресценции данного соединения регистрируется на длине волны 540 нм при возбуждении на 520 нм, что соответствует характеристикам бромированного флуоресцеина — эозина Y. Подобраны оптимальные условия (фосфатно-солевой буфер (рН 7. 4), содержащий 137 мМ NaCl, 5 мкМ флуоресцеина, 15 - 30 мМ NaBr и 25 - 50 мкМ Н[2]О[2]) для регистрации образования в растворе HOBr, на основании чего предлагается качественный метод определения бромирующей активности МПО in vitro. С использованием разработанного метода исследовано влияние физиологических и искусственно синтезированных ингибиторов, а также скэвенджеров активных форм кислорода и галогенов на бромирующую активность МПО. На основании полученных данных установлено, что флуоресцеин представляет собой перспективное соединение для разработки на его основе флуоресцентного метода регистрации бромирующей активности гемсодержащих пероксидаз млекопитающих. |
Название источника | Журнал прикладной спектроскопии |
Место и дата издания | 2024 |
Прочая информация | Т. 91, № 2. - С. 234-244 |